Lodder和Kreger Van Rij(1952)推薦用改良的載玻片培養(yǎng)技術(shù)檢測(cè)擲孢酵母科中擲 孢子的產(chǎn)生。檢測(cè)時(shí)常使用一種很細(xì)的U形玻璃棒。將U形玻璃棒、載玻片和濾紙片擺 放在培養(yǎng)培養(yǎng)皿內(nèi)一起滅菌。將瓊脂培養(yǎng)基(酵母浸膏、粗磨玉米粉或馬鈴薯葡萄糖瓊脂)加 到一個(gè)載玻片上,在瓊脂上接種酵母菌后將其翻轉(zhuǎn)，置于U型玻璃棒上的另一個(gè)載玻片 上，蓋上培養(yǎng)基蓋，置于25培養(yǎng)。培養(yǎng)后，在顯微鏡鏡下觀(guān)察下層的載玻片是否有擲孢 子產(chǎn)生，再觀(guān)察上層載玻片上酵母菌的形態(tài)和培養(yǎng)特性。

 

2、形成擲孢子

推薦用改良的載玻片培養(yǎng)技術(shù)檢測(cè)擲孢酵母科中擲孢子的產(chǎn)生。檢測(cè)時(shí)常使用一種很細(xì)的口形玻璃棒。將U形玻璃棒、載玻片和濾紙片擺放在培養(yǎng)皿內(nèi)一起滅菌。將瓊脂培養(yǎng)基(酵母浸膏、粗磨玉米粉或馬鈴薯葡萄糖瓊脂〕加到一個(gè)載玻片上，在瓊脂上接種酵母菌后將其翻轉(zhuǎn)，置于I：型玻璃棒上的另一個(gè)載玻片上，蓋上培養(yǎng)皿蓋，置于25培養(yǎng)。培養(yǎng)后，在顯微鏡鏡下觀(guān)察下層的載玻片是否有擲孢子產(chǎn)生，再觀(guān)察七層載玻片上酵母菌的形態(tài)和培養(yǎng)特性。

 

3、發(fā)酵糖類(lèi)

將酵母菌接種于含糖的發(fā)酵肉湯管中(預(yù)先裝有倒置的發(fā)酵管)，該肉湯中含有0.5%酵母膏和2%的糖類(lèi)物質(zhì)，同時(shí)配制無(wú)糖的陰性對(duì)照管(有的酵母膏中含有能使酵母菌發(fā)酵的海藻糖〉，25培養(yǎng)10d，每天進(jìn)行觀(guān)察。

 

4、利用乙酵作為唯一碳源

在乙醇肉湯管中接種少量待測(cè)的酵母菌，同時(shí)接種一管不含乙醇的肉湯培養(yǎng)基。25培養(yǎng)3周以上，隨時(shí)觀(guān)察其生長(zhǎng)情況。在培養(yǎng)基中，酵母膏溶液能夠提供維生素和生長(zhǎng)因子，所以檢測(cè)酵母菌生長(zhǎng)狀況時(shí),必須同時(shí)用含有和不含乙醇的雙管肉湯對(duì)比培養(yǎng)，以確保不產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。

 

5、對(duì)環(huán)乙酰亞胺的耐受力

將酵母菌接種于經(jīng)過(guò)濾除菌，每毫升含有0. 5%的葡萄糖和100μg兩環(huán)乙酰亞胺的酵 母菌氮基礎(chǔ)0392培養(yǎng)基中，25培養(yǎng)4周，每周觀(guān)察其生長(zhǎng)情況。第1周生長(zhǎng)良好的說(shuō) 明菌種對(duì)環(huán)乙酰亞胺的耐受力強(qiáng)，第3~4周菌體生長(zhǎng)仍不好甚至不生長(zhǎng)的,說(shuō)明菌種對(duì)環(huán)乙酰亞胺十分敏感。